تهیه آنتی بادی پلی کلونال علیه پروتئین فعال کننده ی سلول های B
|
رسول مردانی جونقانی ، شیوا ایرانی ، مهدی حبیبی انبوهی ، مهدی بهدانی*  |
مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، آزمایشگاه ونوم و بیومولکولهای درمانی، انستیتو پاستور ایران، ایران، تهران |
|
چکیده: (430 مشاهده) |
زمینه و هدف: پروتئین فعالکنندهی سلولهای B (BAFF) عضوی مهم از خانوادهی فاکتور نکروزدهنده تومورها میباشد. بیان بیش از اندازهی این پروتئین در برخی بیماریهای خودایمنی و سرطانها مشاهده شده است بنابراین این پروتئین میتواند بهعنوان یک نشانگر تشخیصی و نیز یک هدف درمانی احتمالی مورد استفاده قرار گیرد. هدف مطالعه حاضر تولید پلیکلونال آنتیبادی شتری برای شناسایی بخش خارجسلولی پروتئین BAFF میباشد.
روشها: سازه ژنی بیانی حاوی بخش خارجسلولی پروتئین BAFF انسانی تهیه و به باکتری اشرشیاکولی (E.coli BL21 (DE3)) منتقل شد. بیان این پروتئین توسط ایزوپروپیل تیوگالاکتوزید القاء و تخلیص با استفاده از ستون کروماتوگرافی تمایلی -NTA نیکل انجام شد. پروتئین به صورت زیرجلدی در چند مرحله به همراه ادجوانت فروند به شتر تزریق شد. عملکرد آنتیبادی های پلیکلونال در شناسایی پروتئین BAFF سرم جدا شده شتر با تستهای الایزا، وسترن بلاتینگ و فلوسایتومتری بررسی شد.
یافتهها: ایمنسازی شتر پس از تزریق پروتئین BAFF نوترکیب با استفاده از تست الایزا اثبات شد. تستهای فلوسایتومتری وسترن بلات نشان داد که آنتیبادی پلیکلونال حاصله قادر به شناسایی پروتئین در سطح سلول میباشد.
نتیجهگیری: باتوجه به نتایج بدست آمده، آنتیبادی پلیکلونال حاصل از سرم شتر قادر به تشخیص و اتصال اختصاصی به پروتئین BAFF بوده و قابلیت استفاده بهعنوان یک عامل تشخیصی و درمانی را دارد.
|
|
واژههای کلیدی: آنتی بادی، پروتئین فعال کنندهی سلولهای B، پلی کلونال آنتی بادی، شتر |
|
متن کامل [PDF 1713 kb]
(277 دریافت)
|
نوع مطالعه: پژوهشي اصیل |
موضوع مقاله:
سایر موارد
|
|
|
|
|
ارسال نظر درباره این مقاله |
|
|