گروه فیزیولوژی و فارماکولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
چکیده: (630 مشاهده)
زمینه و هدف: استخراج DNA ژنومی توکسوپلاسما گوندی از مغز موش صحرایی به دلیل میزان ناچیز آلودگی و چربی زیاد مغز چالش برانگیز است. واکنش کمی زنجیرهای پلیمراز در زمان واقعی (RT-qPCR) علیرغم تشخیص مقادیر ناچیز ژن هنوز با نتایج منفی-کاذب همراه است. ما با تغییر روش استخراج DNA از بافت مغز موش توانستیم تعداد موارد منفی-کاذب آلودگی به توکسوپلاسما گوندی را کاهش دهیم. روش‌ها: از مغز یازده موش (نر ویستار) آلوده به سوش تهران انگل توکسوپلاسما (در هفته هشتم آلودگی ) و سه موش غیرآلوده استفاده شد. جهت تخلیص DNA بجای 20 میلی‌گرم مغز (روش معمولی) کل مغز استفاده شد. میزان آنزیم پروتئیناز کا دو برابر و مدت انکوباسیون شش برابر روش معمول شد. سپس میزان DNA نمونه‌ها با روش RT-qPCR اندازه‌گیری شد. یافته‌ها و نتیجه‌گیری: با روش رایج از یازده موش آلوده فقط سه موش مثبت شدند در حالیکه با بهینه‌سازی تخلیص DNA، نه موش مثبت تشخیص داده شدند.
Yasami-Khiabani S, Choopani S, Babaie J, Golkar M, Sayyah M. Introducing an optimized method for purifying Toxoplasma gondii genomic DNA from rat brain to increase diagnosis efficiency of Toxoplasma infection. Ir J Physiol Pharmacol 2021; 5 :233-238 URL: http://ijpp.phypha.ir/article-1-528-fa.html
یاسمی خیابانی ستایش، چوپانی سمیرا، بابایی* جلال، گل کار مجید، سیاح محمد. معرفی یک روش بهینه تخلیص DNA ژنومی توکسوپلاسما گوندی از مغز موش صحرایی جهت افزایش کارایی تشخیص عفونت توکسوپلاسما. مجله فیزیولوژی و فارماکولوژی ایران. 1400; 5 () :233-238
