|
بهینهسازی سنتز شیمیایی هورمون اکسیتوسین
|
مجتبی بیژنی   ، حسین عطار ، هومن کاغذیان*  |
| انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران |
|
|
چکیده: (13 مشاهده) |
فرآیندهای فیزیولوژیک نظیر انقباضات رحمی، شیردهی و فعالیت محور هیپوتالاموس هیپوفیز آدرنال دارد. حساسیت ساختاری این مولکول و نیمهعمر کوتاه آن، دستیابی به روشهای سنتز دقیق با خلوص دارویی را ضروری میسازد. هدف این پژوهش، بهینهسازی مراحل سنتز شیمیایی اکسیتوسین به روش فاز جامد و ارزیابی ویژگیهای فیزیکوشیمیایی محصول نهایی است.
روشها: سنتز پپتید بر پایه رزین رینک آمید و سیستم فعالساز شامل HATU و باز آلی دی ایزوپروپیل ایتل آمین انجام شد. پس از تکمیل زنجیره، پپتید با مخلوط تریفلوئوراستیکاسید/تریاتیلسیلیان/آب از رزین جدا و پیوند دیسولفیدی میان سیستئین های یک و شش تحت شرایط قلیایی کنترلشده در pH حدود ۸ تشکیل شد. محصول خام با کروماتوگرافی فازی معکوس در مقیاس خالصسازی جداسازی شد. آنالیزهای نهایی شامل کروماتوگرافی تحلیلی، طیفسنجی جرمی، سنجش pH، آزمون اندوتوکسین و ارزیابی ظاهری انجام گرفت.
یافتهها: پپتید حاصل دارای خلوص 99/6 درصد، پیک یکتای کروماتوگرافی و جرم مولکولی منطبق با مقدار تئوریک بود. طیف سنجی جرمی یونش پاششی پیک غالب (نسبت جرم به بار 1007/2 ) را نشان داد. مقدار pH برابر ۲/۵ ± ۱/۰ و آزمون اندوتوکسین مقدار (کمتر از 0/25 واحد اندوتوکسین در هر میلیلیتر) را ثبت کرد، که حاکی از ایمنی میکروبیولوژیک و حذف کامل آلودگیهای پیروژنی است. این مجموعه یافتهها نشان داد که فرآیند طراحیشده قادر است پپتیدی با پایداری فیزیکی مناسب، ساختار صحیح، خلوص دارویی و یکنواختی ظاهری تولید کند.
نتیجهگیری: بهینهسازی مرحلهای سنتز فاز جامد شامل تنظیم نسبت فعالساز/باز، افزایش کنترلشده زمان کوپلینگ و اجرای اکسیداسیون ملایم، منجر به تولید اکسیتوسین با خلوص بالا، جرم منطبق با مقدار تئوریک و بازده 69/8 درصد شد. کاهش زمان فرایند از ۸۰ به ۶۸ ساعت بیانگر افزایش راندمان بدون افت کیفیت بود. این پروتکل بهعنوان نسخهای اصلاحشده و قابلاتکا، قابلیت تکرارپذیری و انتقال به مقیاسهای بزرگتر را دارد.
|
|
| واژههای کلیدی: بهینهسازی، سنتز پروتئین، فاز جامد، هورمون اکسیتوسین |
|
|
متن کامل [PDF 709 kb]
(9 دریافت)
|
|
نوع مطالعه: پژوهشي اصیل |
موضوع مقاله:
غدد درون ریز
|
|
|
|
|
|
|
| ارسال نظر درباره این مقاله |
|
|
|
