[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
بخش‌های اصلی
صفحه اصلی::
اطلاعات نشریه::
آرشیو مجله و مقالات::
برای نویسندگان::
برای داوران::
اخلاق نشر::
ثبت نام و اشتراک::
تماس با ما::
::
جستجو در پایگاه

جستجوی پیشرفته
..
دریافت اطلاعات پایگاه
نشانی پست الکترونیک خود را برای دریافت اطلاعات و اخبار پایگاه، در کادر زیر وارد کنید.
..
..
:: جلد 8 - ::
جلد 8 - صفحات 41-32 برگشت به فهرست نسخه ها
طراحی سازه بیانی حاوی ژن دیس اینتگرین شناسایی شده از ترانسکریپتوم عقرب همیسکورپیوس لپتوروس و بررسی عملکرد آن در مدل برون تنی
سحر ابوالقاسمی ، مهدی بهدانی ، فاطمه کاظمی لمعه دشت*
آزمایشگاه ونوم و بیومولکول های درمانی، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
چکیده:   (55 مشاهده)
زمینه و هدف: چسبندگی سلول نقش مهمی در تهاجم سلول­های سرطانی ایفا می­کند. دیس­‌اینتگرین­ها ابزار درمانی مناسبی برای سرطان محسوب می­گردند. هدف از این مطالعه کلونینگ و بیان ژن دیس­‌اینتگرین شناسایی شده از ترانسکریپتوم زهر عقرب همیسکورپیوس لپتوروس در میزبان باکتریایی و بررسی عملکرد آن در مدل برون­‌تنی می‌­باشد.
روش‌ها: در ابتدا ساختارهای اول، دوم و سوم پروتئین دیس اینتگرین با استفاده از ابزار بیوانفورماتیک مورد بررسی قرار گرفت. سپس ژن سنتز و در وکتور pET-22b کلون شد. سازه بدست­آمده به میزبان باکتری اشریشیا کلای BL-21 ترانسفورم شد. بیان پروتئین توسط نیم میلی مولار ایزوپروپیل-بتا-D-تیوگالاکتوپیرانوسید القا شد. بیان با استفاده از ژل سدیم دودسیل سولفات-پلی آکریل آمید و وسترن بلات بررسی و تایید شد. پروتئین با استفاده از کروماتوگرافی میل ترکیبی نیکل در شرایط دناتوره خالص‌­سازی شد. پس از خالص‌سازی، پروتئین با حذف تدریجی اوره از طریق دیالیز دوباره تا شد. پس از بیان پروتئین و خالص سازی، اثر مهاری دیس اینتگرین بر بقا و مهاجرت رده‌­های سلولی HUVEC به ترتیب با استفاده از روش MTT و Transwell مورد بررسی قرار گرفت.
یافته‌ها: نتایج تجزیه و تحلیل ساختاری نشان داد که ساختار پیش‌بینی‌شده دیس‌­اینتگرین ویژگی‌های معمولی را نشان می‌دهد و با الگوهای ساختاری مورد انتظار مشاهده‌شده در پروتئین‌های دیس‌اینتگرین مطابقت دارد. بالاترین سطح بیان پروتئین با غلظت ایزوپروپیل-بتا-D-تیوگالاکتوپیرانوسید 0/5 میلی مولار و انکوباسیون 5 ساعته مشاهده شد. وزن مولکولی پروتئین بیان شده تقریباً 12 کیلو دالتون بود. دیس اینتگرین رشد سلول های HUVEC را با 50 IC37 میکروگرم در میلی لیتر پس از یک دوره انکوباسیون 48 ساعته مهار کرد. علاوه بر این، دیس­اینتگرین خالص شده، مهاجرت 70 درصد از سلول‌های HUVEC را به سمت منبع فاکتور رشد اندوتلیای عروقی، در مقایسه با گروه کنترل بدون دیس‌ اینتگرین، مهار کرد.
نتیجه‌گیری: نتایج حاکی از پتانسیل دیس­اینتگرین در مهار رشد و مهاجرت سلولهای اندوتلیال انسان می باشد.
 
واژه‌های کلیدی: ترانسکریپتوم، دیس­اینتگرین، عقرب همیسکورپیوس لپتوروس
متن کامل [PDF 969 kb]   (40 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي اصیل | موضوع مقاله: علوم اعصاب
ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Abolghasemi S, Behdani M, Kazemi-Lomedasht F. Designing an expression construct containing the disintegrin gene identified from the transcriptome of the scorpion Hemiscorpius lepturus and evaluation of its function in an in vitro model. Ir J Physiol Pharmacol 2025; 8 :32-41
URL: http://ijpp.phypha.ir/article-1-698-fa.html

ابوالقاسمی سحر، بهدانی مهدی، کاظمی لمعه دشت فاطمه. طراحی سازه بیانی حاوی ژن دیس اینتگرین شناسایی شده از ترانسکریپتوم عقرب همیسکورپیوس لپتوروس و بررسی عملکرد آن در مدل برون تنی. مجله فیزیولوژی و فارماکولوژی ایران. 1403; 8 () :32-41

URL: http://ijpp.phypha.ir/article-1-698-fa.html



بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.
جلد 8 - برگشت به فهرست نسخه ها
مجله فیزیولوژی و فارماکولوژی ایران Iranian Journal of Physiology and Pharmacology
Persian site map - English site map - Created in 0.05 seconds with 38 queries by YEKTAWEB 4657